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技术重复性是评价药物筛选平台可靠性的核心指标。爱思益普生物的激酶谱平台通过严格的质量控制体系,确保了实验数据的重复性误差小于15%。在BRAF V600E突变黑色素瘤项目中,平台对同一批化合物进行三次独立筛选,IC50值变异系数(CV)均低于15%,为后续药物优化提供了稳定的数据基础。
平台采用的多维度检测技术联用策略是保障数据可靠性的关键。放射标记滤膜结合法通过同位素标记追踪磷酸基团转移,具有极高的灵敏度;ADP-Glo™荧光法通过检测ADP生成量量化激酶活性,适用于高通量筛选;SPR技术则通过监测激酶-配体结合引起的折射率变化,实时量化结合亲和力。三种技术互补,覆盖了激酶活性检测的全场景需求。例如,在EGFR T790M/C797S双突变抑制剂筛选中,平台同时采用放射标记法与ADP-Glo法验证候选分子活性,两种方法测得的IC50值差异小于10%,充分证明了数据的可靠性。
此外,平台建立的激酶蛋白库涵盖野生型及突变体,所有蛋白均经过质谱验证确保序列准确性。实验过程中,平台严格控制反应条件,包括pH值、离子浓度及反应时间,并通过阳性对照与阴性对照监控实验质量。这种全流程质量控制体系,使爱思益普的技术重复性数据成为国际药企验证化合物活性的黄金参考。
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