靶向蛋白降解实验|PROTAC药物开发平台|PROTAC三元复合物检测

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靶向蛋白降解实验|PROTAC药物开发平台|PROTAC三元复合物检测

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靶向蛋白降解（TPD）技术的核心机制在于PROTAC分子同时结合靶蛋白与E3泛素连接酶，形成稳定的三元复合物，进而触发泛素-蛋白酶体通路实现靶蛋白降解。这一"分子黏合"过程的效率直接决定降解活性，因此三元复合物的精准表征成为PROTAC研发的关键环节。爱思益普检测平台整合光谱位移法（SPS）、均相时间分辨荧光（HTRF）及表面等离子共振（SPR）三大技术，构建了业界领先的三元复合物表征体系。

光谱位移法（SPS）通过检测分子间相互作用引起的光谱变化，灵敏反映PROTAC分子与E3连接酶（如CRBN）的结合情况。该方法无需标记，避免了荧光标签对分子构象的潜在干扰，能够真实反映复合物形成的亲和力与稳定性。在STAT6降解剂KT-621的研发中，平台采用SPS技术评估PROTAC分子与CRBN的结合亲和力，结合HTRF技术验证"E3连接酶-PROTAC-靶点"三元复合物的组装效率，最终实现pM级亲和力的精准调控。

HTRF技术基于荧光共振能量转移原理，通过供体荧光团与受体荧光团的空间 proximity 变化定量分析三元复合物形成。平台优化了供体/受体标记策略，将CRBN与靶蛋白分别标记，PROTAC分子的加入导致荧光信号增强，信号强度与三元复合物浓度呈正相关。这种设计实现了高通量筛选，单次实验可评估数百种PROTAC分子的三元复合物形成能力。

SPR技术则提供动力学层面的深度解析。通过将靶蛋白或E3连接酶固定于芯片表面，实时监测PROTAC分子的结合与解离过程，获取结合速率常数（Ka）、解离速率常数（Kd）及平衡解离常数（KD）。在某STAT3降解剂项目中，平台仅通过SPR结合动力学分析与HiBiT降解检测模块，即完成关键机制验证，研发周期缩短40%。这种"动力学+功能性"的模块化组合，显著提升了研发效率。

上一条：PROTAC三元复合物检测|HiBiT蛋白降解检测|分子胶筛选服务