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流式细胞术:单细胞水平的高通量分析

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流式细胞术:单细胞水平的高通量分析

流式细胞术概念示意图:单细胞通过激光束的多参数荧光检测

把"一群细胞"变成"一个个细胞"

传统的生化检测,往往把一整群细胞当作一个整体来读数——测出来的是一群细胞的平均信号。但细胞群体内部是高度异质的:同样是免疫细胞,有的处于活化状态,有的处于静息状态;同样是肿瘤细胞,有的在增殖,有的在凋亡。这种异质性,恰恰是很多关键生物学问题藏身之处。而流式细胞术的价值,正在于它能把"一群细胞"拆解成"一个个细胞",逐个、快速地分析它们的表型与状态。

流式细胞术是一种快速、高效、灵敏的检测技术,可以对细胞内和细胞表面的蛋白、核酸或标记物进行快速分析。它的应用范围覆盖了药物研发中常用的一批检测需求:细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞内细胞因子、细胞内磷酸化蛋白、免疫细胞分型等。在爱思益普的流式平台上,还进一步延伸到血液细胞亚群分析、肿瘤浸润细胞分析等更贴近临床前研究场景的实验类型。

从表型到信号通路,两种应用维度

流式细胞术的应用,大致可以分为两个维度。个维度是"看表型"——细胞表面表达什么标记物、属于哪个亚群、处于周期的哪个阶段、是否在凋亡。这类应用直接支撑了免疫细胞分型、血液亚群分析、肿瘤浸润细胞分析等场景。第二个维度是"看信号"——细胞内部发生了什么样的信号变化,比如细胞因子的分泌、关键蛋白(如 STAT5)的磷酸化水平。这类应用则深入到信号通路的层面。

以具体的案例为例:化合物对 IL-2 诱导的 T 细胞中 STAT5 磷酸化的抑制检测,属于典型的"看信号"——它回答的是一个候选物能否阻断某条免疫激活通路;而 PBMC 中细胞亚群分析,则属于典型的"看表型"——它回答的是外周血里各类免疫细胞的比例与状态。两种维度互补,构成了从"细胞是什么"到"细胞在干什么"的完整观察。

高通量多因子,补齐流式的另一块短板

流式细胞术擅长的是单细胞的多参数分析,但在可溶性因子的高通量定量上,需要另一套技术的配合。MSD(Meso Scale Discovery)平台正是这样一个补充:它能够同时检测多种疾病相关的生物标志物和细胞因子,评估药物在细胞和动物模型中的剂量反应与动力学影响。它的灵敏度远超常规 ELISA,支持细胞上清、血浆、细胞裂解液、组织匀浆等复杂样本,还能做单因子、多因子 panel 乃至定制化的组合检测。

流式与 MSD 的组合,构成了一个完整的"细胞水平检测矩阵":流式看单个细胞的表型与信号,MSD 看群体分泌的可溶性因子。当药物研发越来越强调"既要知道细胞变成了什么样,也要知道细胞分泌了什么"时,这种单细胞与高通量相结合的能力,就成了支撑决策的那块基石。

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