NanoBiT 采用 NanoLuc 荧光素酶的两个亚基：大片段 LgBiT 与小片段 SmBiT，分别融合两个目的蛋白。当两个蛋白相互作用时，LgBiT 与 SmBiT 靠近并重建为活性荧光素酶，产生生物发光。
发光信号强度与蛋白相互作用的强度和持续时间相关。由于 NanoBiT 片段自身亲和力低、仅在目的蛋白拉近时才高效互补，体系背景低、相互作用特异性高。
NanoBiT PPI 检测在递增浓度 DNMDP 存在下测量 PDE3A 与 SLFN12 的相互作用，发光信号反映 NanoBiT 片段的重建程度，提供蛋白相互作用的定量读出。
GPCR 与 β-arrestin 的相互作用是众多受体信号通路的核心环节，也是 NanoBiT PPI 平台的重要应用：将 LgBiT 融合 β-arrestin、SmBiT 融合 GPCR，受体激活使两个片段靠近并产生实时发光信号，直接读出受体-arrestin 招募，支撑 GPCR 靶向药物的功能分析与化合物表征（联动 GPCR 检测服务）。
低亲和力 NanoBiT 片段最大限度减少自发互补，信号反映真实蛋白相互作用而非非特异背景。
单次试剂添加即可用常规发光检测设备读数，无需特殊仪器。
可检测弱与强 PPI，并可在浓度范围内监测相互作用变化。
适合需要活细胞实时定量读出相互作用强度与动态的研究，包括化合物诱导/阻断的 PPI（如 DNMDP 诱导的 PDE3A-SLFN12）以及 GPCR/β-arrestin 招募等受体信号研究。
NanoBiT 是分裂荧光素酶互补发光，操作简便、单试剂读数、动态范围宽；NanoBRET PPI 是供体-受体能量转移，适合连续监测邻近变化。爱思益普两种体系均可提供，按相互作用类型与读数需求选择。
NanoBiT 片段自身亲和力低，只在目的蛋白拉近时才互补，背景低、特异性高；宽动态范围支持弱与强相互作用的检测。
常规发光检测仪即可，单次加样读数，无需特殊设备；可按项目需求设计浓度梯度与时间动力学读数。
