大鼠肉瘤（ RAS ）是第一个被发现的人类肿瘤基因，也是人类癌症中最常见的突变癌基因。 RAS 基因被认为是肿瘤中最常见的突变基因之一，存在于大约 30% 的人类癌症中，其中 95% 是 KRAS 突变。 KRAS 突变在各种恶性肿瘤中以不同的比例发生。大多数 KRAS 突变破坏了 KRAS 的内在 GTP 酶活性，导致 KRAS 的激活无法将 GTP 水解为 GDP 。这些突变导致 Ras 蛋白的持续激活，持续激活下游信号通路，最终驱动不受控制的细胞增殖，抑制凋亡，增强侵袭性，促进血管生成。这些致癌机制有助于各种癌症的发展和进展，使 KRAS 成为癌症研究和治疗干预的重要靶点。
ICE Bioscience提供了全面的解决方案，包括蛋白质纯化、蛋白质相互作用测定、 SPR KRAS WT/ 突变体结合测定和细胞增殖测定。我们目前拥有广泛的 KRAS 突变变体（ G12D/C/V/R/S 、 G13D/C 、 Q61H ），以及 RAS 家族的另外两个成员， HRAS 和 NRAS 。我们稳定的酶学、生物物理学和细胞学检测旨在促进药物发现工作并加快药物开发过程。
在 ICE Bioscience ，我们提供全面的重组蛋白，包括各种 KRAS 突变变体（ G12D/C/V/R/S 、 G13D/C 、 Q61H ）、 HRAS 、 NRAS ，以及上游和下游相关蛋白，如 SOS1 和 cRAF 。每批蛋白都经过严格的活性验证，以确保纯度和功能性。我们还提供负载 GDP 的蛋白，以满足广泛的实验要求。
M：MW 标准；1：1 μg KRAS G12D；2：3 μg KRAS G12D。
SEC-HPLC 显示单一主峰，纯度符合 QC 标准。
KRAS G12D 蛋白、底物与微珠 25 ℃ 共孵育 60 min 后读取 665/620 比值，信号随蛋白量饱和上升。
MRTX1133 在 KRAS G12D-GDP HTRF 实验中的 IC50 为 5.841 nM。
KRAS可以与鸟嘌呤核苷酸交换因子（ GEF ）如 SOS1 和 SOS2 相互作用。活化的 KRAS 还可以与下游 cRAF 结合，启动下游信号通路。在 ICE Bioscience ，我们利用 HTRF 方法评估 KRAS 与 SOS1 、 SOS2 和 cRAF 结合的相互作用，从而深入了解小分子对 KRAS 的抑制作用。
（ A ） KRAS/RAF 结合试验原理。（ B ） 使用 HTRF 方法基于 HTRF 检测 KRAS G12D 和 cRAF 结合的化合物抑制。（ C ） 基于 HTRF 的 KRAS G12C 和 SOS1 结合的化合物抑制检测。（ D ） 基于 HTRF 检测 MRTX1133 对 KRAS G12C 和 SOS2 结合的抑制作用。
KRAS与鸟嘌呤核苷酸交换因子 SOS1 结合后， GDP 被释放，使 GTP 与 KRAS 结合，随后激活它。在 ICE Bioscience ，我们采用两种方法来评估小分子对 KRAS NEA 的抑制作用。第一种方法利用荧光标记的 BODIPY-GTP ，由 SOS1 催化，与标记的 KRAS 结合。 KRAS 与 BODIPY-GTP 之间的相互作用采用 TR-FRET 方法进行评估。第二种方法涉及在 SOS1 的影响下，标记 KRAS 从不活跃的 GDP 状态过渡到活跃的 GTP 状态。激活的 GTP 结合 KRAS 然后与下游标记的 cRAF 相互作用。通过 HTRF 方法测量 GTP 结合 KRAS 与 cRAF 之间的相互作用，间接反映 KRAS 交换的程度。
两种 KRAS 突变体核苷酸交换活性的小分子抑制评价。（ A ） KRAS 和 BODIPY-GTP 核苷酸交换 TR-FRET 测定原理的示意图。（ B ） 使用 KRAS 和 BODIPY-GTP 核苷酸交换 TR-FRET 方法检测 MRTX1133 对 KRAS G12D_GDP/G12V_GDP 中核苷酸交换的抑制作用。（ C ） KRAS_GDP 、 GTP 和 CRAF 核苷酸交换 HTRF 测定原理的示意图。（ D ） 使用 KRAS_GDP 、 GTP 和 cRAF 核苷酸交换 HTRF 方法检测 MRTX1133 对 KRAS G12D_GDP/G12V_GDP 中核苷酸交换的抑制作用
表面等离子体共振（ SPR ）用于量化分子的结合亲和力和动力学。 ICE Bioscience 已经建立了 SPR 方法来评估小分子与各种 KRAS 突变变体的结合，涵盖了 GDP 和 GTP 结合状态。
(A) MRTX1133与 KRAS WT 、 G12C 、 G12D 和 G12V 相互作用的 SPR 传感器图和拟合。 (B) SPR 传感器图和拟合图显示了 BI-2865 与 KRAS WT 、 G12C 、 G12D 和 G12V 之间的相互作用，这些蛋白装载了 GDP 。
Ba/F3细胞是一种小鼠前 B 细胞系，其独特的特点是依赖于小鼠白细胞介素 -3 （ mIL3 ）刺激进行体外增殖。酪氨酸激酶在这些细胞中几乎不存在，这使得它们成为建立表达酪氨酸激酶受体的稳定转染物的理想背景。 ICE Bioscience 共获得了 33 个 Ba/F3 稳定的与 KRAS 突变相关的转染细胞系，满足了广泛的研究需求。凭借我们专业的 Ba/F3 检测开发团队，我们提供全面的 Ba/F3 细胞系生成服务，为您的特定细胞系需求提供一站式解决方案。我们还提供了针对 KRAS 靶点的 cell Panel 。
(A) TKIs在 Ba/F3 激酶细胞系中的筛选原理。 (B) Ba/F3 KRAS 细胞株 CTG 增殖实验。
按照药物研发逻辑衔接上下游与同家族靶点服务。
RAS是第一个被发现的人类肿瘤基因，存在于大约30%的人类癌症中，其中95%是KRAS突变。大多数KRAS突变破坏了KRAS的内在GTP酶活性，导致Ras蛋白持续激活，驱动不受控制的细胞增殖、抑制凋亡、增强侵袭性并促进血管生成。
我们目前拥有广泛的KRAS突变变体，包括G12D/C/V/R/S、G13D/C、Q61H，以及RAS家族的另外两个成员HRAS和NRAS，并提供SOS1和cRAF等上下游相关蛋白。每批蛋白都经过严格的活性验证，还可提供负载GDP的蛋白以满足广泛的实验要求。
ICE Bioscience提供全面的解决方案，包括蛋白质纯化、基于HTRF的蛋白-蛋白相互作用测定（KRAS与SOS1、SOS2、cRAF结合）、两种核苷酸交换实验方法（BODIPY-GTP TR-FRET与HTRF）、涵盖GDP和GTP结合状态的SPR结合测定，以及细胞增殖测定。
ICE Bioscience共获得33个Ba/F3稳定的与KRAS突变相关的转染细胞系，并提供针对KRAS靶点的cell Panel。凭借专业的Ba/F3检测开发团队，我们还提供全面的Ba/F3细胞系生成服务，为您的特定细胞系需求提供一站式解决方案。
我们稳定的酶学、生物物理学和细胞学检测旨在促进药物发现工作并加快药物开发过程，从重组蛋白、相互作用测定到细胞增殖形成完整的KRAS抑制剂评价体系。
