将一个蛋白标记 NanoLuc 荧光素酶作为能量供体,相互作用蛋白融合 HaloTag 作为受体。当两个蛋白发生相互作用时,HaloTag 配体(HL)与 HaloTag 结合并靠近 NanoLuc,产生可检测的 BRET 信号。
PPI 诱导:促进型分子拉近两个蛋白,NanoLuc-HaloTag 邻近度增加,BRET 信号增强;PPI 抑制:阻断型分子拉大两个蛋白距离,信号减弱。同一体系因此可捕获蛋白相互作用的正向与负向调控,适用于广泛的 PPI 动态研究。
在活细胞内以全长蛋白、天然构象研究 PPI,更贴近生理状态。
NanoLuc-HaloTag 体系灵敏度高、背景低,可检测弱或瞬时的相互作用。
兼容 96 孔与 384 孔板,支持规模化筛选与药物发现研究。
活细胞 + 全长蛋白的检测体系,更真实反映天然生物学条件。
同时捕获 PPI 诱导与抑制,覆盖多样相互作用类型与化合物效应。
支持 PPI 调节剂的高通量筛选,助力高效药物发现。
NanoBRET PPI 基于共振能量转移(供体 NanoLuc + 受体 HaloTag 荧光配体),适合实时定量邻近变化;NanoBiT 基于分裂荧光素酶互补(LgBiT + SmBiT),加样即读、操作简便。爱思益普两种体系均可提供,可按目标相互作用类型选择。
可以。NanoLuc-HaloTag 体系灵敏度高、背景低,支持弱或瞬时 PPI 的检测;全长蛋白、活细胞环境也有助于保留天然相互作用强度。
可以。诱导使 BRET 信号增强、抑制使信号减弱,同一体系即可双向读出,适合筛选 PPI 促进与阻断两类分子。
兼容 96 孔与 384 孔板,可从单对相互作用确证扩展到调节剂筛选规模。