MST微量热泳动：无标记互作检测的第三种标尺

分子互作检测，为什么需要"第三种方法"

评价两个分子之间"结不结合、结合多强"，是药物发现中基础也频繁的问题。经典的方法各有其长，也各有其限：SPR（表面等离子共振）需要把一方固定在芯片上，擅长实时追踪结合与解离的动力学；ITC（等温滴定量热）直接测量热量变化，信息完整，但对样品量和浓度要求较高。那么，有没有一种方法，既能像 SPR 一样灵敏，又不需要固定、对样品量要求不高呢？

微量热泳动（MicroScale Thermophoresis，MST）正是对这一需求的回应。MST 的独特之处在于它利用"热泳动"这一物理现象——分子在微观温度梯度下会发生定向迁移，而迁移的速度会随着分子结合状态的改变而改变。当一个小分子与蛋白结合后，蛋白的尺寸、电荷、水化层等都会发生变化，其热泳动行为也随之改变。通过监测荧光标记分子的热泳动轨迹，MST 就能还原出结合亲和力（Kd）。

免固定、低耗样、近天然态的优势

MST 之所以在近十年迅速普及，靠的是几个实打实的优势。，它免固定：不需要把分子共价连接到芯片或磁珠上，避免了固定化过程对分子构象的干扰，让检测更接近分子在溶液中的天然状态；第二，它低耗样：一次实验只需要几微升、纳摩尔甚至更低浓度的样品，这对珍贵的膜蛋白、难表达靶点或稀有化合物而言至关重要；第三，它不挑缓冲液：对样品缓冲液、去垢剂甚至复杂基质（如细胞裂解液、血清）都有较好的耐受性，适用面非常宽。

爱思益普的 MST-TRIC 检测服务，正是基于这一技术构建的分子互作检测能力。TRIC（Temperature Related Intensity Change）是与 MST 联用的荧光读出模式，通过对温度跃迁前后荧光强度的变化进行比对，实现对分子互作的高灵敏检测。两者结合，让 MST-TRIC 在保留免固定、低耗样优势的同时，进一步提升了检测的灵敏度与数据质量。

从苗头化合物到复合物，一套通用标尺

在药物发现的不同阶段，MST-TRIC 都能派上用场。在先导化合物筛选阶段，它可以快速、平行地测定大量候选物对同一靶点的亲和力，帮助研究者快速锁定苗头化合物；在靶点验证阶段，它可以验证一个小分子、抗体甚至核酸适配体是否真正与靶点结合；对于 PROTAC 等复杂体系，MST 还可以用来表征三元复合物的形成。对研发者而言，MST-TRIC 是一套既"省样"又"不挑条件"的通用标尺，与 SPR、ITC 等正交方法彼此印证，就能把一个结合事件的来龙去脉看得更清、更准。