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在药物发现中,候选物与靶蛋白"能不能结合、结合得有多牢",是核心的问题之一。围绕这个命题,业界已经发展出了多种无标记或标记型的检测技术,各有各的适用场景:SPR 是"金标准",提供动力学信息;ITC 无标记,一次读全热力学;MST 则在复杂体系中也能稳定工作。那么,是否还需要另一种方法?
答案是肯定的。因为现实中的样品千差万别——有的蛋白难以大量纯化、有的配体带有自身荧光干扰、有的项目要求极快地拿到结合数据。面对这些不同需求,单一的检测手段往往捉襟见肘。光谱位移(Spectral Shift,简称 SpS)技术,正是为填补这些空白而生的"又一盏灯"。
光谱位移技术的原理,建立在荧光信号的温度依赖性(Temperature Related Intensity Change,简称 TRIC)之上。荧光的强度通常会随温度升高而衰减,而当配体与荧光标记的分子发生结合时,会直接或间接地改变荧光基团所处的化学微环境,从而改变这种温度依赖的荧光信号(TRIC 信号)。通过检测结合前后荧光信号的变化,就可以灵敏地评估生物分子之间的相互作用。
这套方法的优势很实在。一方面,它监测的是荧光标记分子与配体的相互作用,能够灵敏地检测到"更真实"的结合情况;另一方面,它所需的样品与分析方法优化较少,能够在更短的时间内输出可靠的结合亲和力 Kd 值数据。此外,由于检测不依赖表面固定,也避免了固定化可能带来的构象影响。对于追求效率的早期筛选项目而言,这种"快"本身就是巨大的价值,而"准"与"省样品"则进一步放大了它的实用性。
爱思益普依托战略合作伙伴 NanoTemper 旗下的高灵敏度分子互作仪 Dianthus,将的光谱位移技术与温度相关强度变化(TRIC)技术相结合,提供高通量光谱位移 & MST-TRIC 检测服务,为医药研发客户提供精确、高灵敏度的结合分析。这一平台在较少的方法优化下,即可更快地输出高质量的 Kd 值数据。
对研发者而言,SpS 的价值不在于替代 SPR、ITC 或 MST,而在于与之互补——当传统方法因样品限制或时间压力而难以施展时,SpS 提供了另一种可能。多一把尺子,就意味着多一种验证手段、多一份数据交叉。在分子互作检测这个需要"多把尺子丈量"的领域,光谱位移 SpS 正是那盏让结合情况被更快、更真实照见的新灯。