ADCC/ADCP/CDC
ADCC / ADCP / CDC

ADCC/ADCP/CDC

ADCC、ADCP 和 CDC 检测服务旨在评估治疗性抗体和其他免疫调节剂介导靶细胞(如癌细胞或病原体)免疫反应的机制。这些检测对抗体疗法的开发和优化至关重要,为了解其疗效和作用机制提供了重要依据。

ADCC

ADCC 抗体依赖性细胞介导的细胞毒性

ADCC 主要检测免疫效应细胞(如 NK 细胞)识别和杀伤抗体结合的靶细胞的能力。这种机制对许多治疗性抗体的作用至关重要,尤其是在癌症免疫疗法中。

主要特点

  • 效应细胞:NK 细胞是主要的免疫杀伤细胞,但其他免疫细胞包括巨噬细胞、中性粒细胞和其他表达 Fc 受体的细胞同样可以作为效应细胞。
  • 靶细胞:主要包括一系列的肿瘤细胞系、病毒感染的细胞或表达可以被治疗抗体识别的抗原的改造细胞。
  • 杀伤检测:细胞毒性的测量方法包括流式细胞术评估靶细胞死亡程度、发光法测定 ATP 含量(表明细胞存活率)、或高内涵成像法观察和量化细胞杀伤情况。
ADCC 检测结果:NK 细胞杀伤 EC50=19.88 ng/mL、PBMC 杀伤 EC50=0.1194 nM、NK+Treg 共培养 EC50=0.01689 nM
ADCP

ADCP 抗体依赖性吞噬作用

ADCP 检测法评估抗体如何有效地促进巨噬细胞等免疫细胞吞噬靶细胞。这一过程对于清除体内被抗体包裹的病原体、死亡细胞或癌细胞非常重要。

主要特点

  • 效应细胞:主要使用表达 Fcγ 受体(如 FcγRIIa (CD32a)、FcγRI (CD64) 和 FcγRIIIa (CD16a))的单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞。
  • 吞噬活性:评估效应细胞吞噬和消化抗体结合的靶细胞的能力,这是免疫防御和治疗抗体功能的关键机制。
  • 靶细胞:包括肿瘤细胞、受感染细胞或用特异性抗体标记的用于吞噬的微粒。
  • 检测分析:基于方法的不同,可以直接检测,例如通过流式细胞仪或高内涵成像技术测量吞噬作用;也可以间接检测,例如测量报告基因的活性,作为 Fcγ 受体参与和后续信号传导的替代指标。
ADCP 检测结果:Rituximab 剂量依赖发光曲线,FCGRIIA-H IC50=0.01509 µg/mL,无受体对照 ≈0.1058 µg/mL
CDC

CDC 补体依赖性细胞毒性

CDC 主要是测量抗体激活补体系统进而引起靶细胞裂解的能力,这种机制对某些治疗性抗体的作用至关重要,尤其是在治疗血液肿瘤时。

主要特点

  • 补体来源:利用人体血清作为补体蛋白来源,在抗体与靶细胞结合后启动补体级联反应。
  • 靶细胞:重点研究表达治疗抗体目标抗原的细胞系或原代细胞,如表达 CD20 的淋巴瘤 B 细胞。
  • 膜攻击复合物(MAC)的形成:补体级联的终点,MAC 在靶细胞膜上形成孔隙,导致细胞裂解。
  • 检测方法:细胞内成分(如乳酸脱氢酶)释放的检测、流式检测标记的细胞量的变化、细胞活力检测。
CDC 检测结果:20% donorC(EC50=0.08322 µg/mL)与 20% HSC(EC50=0.1576 µg/mL)补体依赖裂解曲线
ADCC 检测结果:NK 细胞杀伤 EC50=19.88 ng/mL、PBMC 杀伤 EC50=0.1194 nM、NK+Treg 共培养 EC50=0.01689 nM
ADCP 检测结果:Rituximab 剂量依赖发光曲线,FCGRIIA-H IC50=0.01509 µg/mL,无受体对照 ≈0.1058 µg/mL
CDC 检测结果:20% donorC(EC50=0.08322 µg/mL)与 20% HSC(EC50=0.1576 µg/mL)补体依赖裂解曲线
FAQ

常见问题

ADCC、ADCP 和 CDC 分别评估什么机制?

ADCC 评估 NK 细胞等效应细胞识别和杀伤抗体结合靶细胞的能力;ADCP 评估巨噬细胞等免疫细胞吞噬抗体结合靶细胞的效率;CDC 测量抗体激活补体系统引起靶细胞裂解的能力,三者均为抗体疗法开发的关键评价手段。

ADCC 检测使用哪些效应细胞和读数方法?

NK 细胞是主要效应细胞,巨噬细胞、中性粒细胞等表达 Fc 受体的细胞也可作为效应细胞;靶细胞包括肿瘤细胞系、病毒感染细胞或改造细胞。细胞毒性可通过流式细胞术、ATP 发光法或高内涵成像测量。

ADCP 检测有什么特点?

主要使用表达 FcγRIIa(CD32a)、FcγRI(CD64)和 FcγRIIIa(CD16a)的单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞作为效应细胞;吞噬作用可通过流式细胞仪或高内涵成像直接测量,也可通过报告基因活性间接评估。

CDC 检测的原理和方法是什么?

利用人体血清作为补体来源,抗体与靶细胞结合后启动补体级联反应,最终形成膜攻击复合物(MAC)在靶细胞膜上成孔导致裂解;检测方法包括乳酸脱氢酶释放、流式检测和细胞活力检测,典型靶细胞如表达 CD20 的淋巴瘤 B 细胞。

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