迁移、趋化与侵袭三类实验,从不同维度解析细胞运动能力。
原理:细胞被种植在上层室,追踪其向含有培养基的下层室的移动,测量细胞通过多孔膜的一般迁移能力。
方法:在设定的孵育期后,对迁移到膜下层的细胞进行固定、染色和定量,衡量细胞固有运动能力和对周围环境的反应。
原理:Transwell 迁移实验的专门版本,特别评估细胞对存在于下层室的化学信号(趋化因子)的定向移动。
方法:下层室填充含有趋化因子的培养基,对细胞向趋化因子的定向迁移进行定量,研究免疫反应和癌症转移中的重要过程。
原理:在多孔膜上引入模拟细胞外基质(ECM)的屏障(如 Matrigel),细胞必须先降解 ECM 屏障才能通过孔隙迁移,模拟组织侵袭过程。
方法:细胞接种在涂有类 ECM 屏障的上层室,孵育后评估其穿透基质并迁移到下层室的能力,适用于研究癌细胞侵袭性及抗转移治疗的有效性。
趋化实验在药物发现中用于测量细胞对化学刺激物的反应性迁移。细胞被放置在带有多孔膜的 96 孔板中,其向趋化因子的移动被定量化(通常通过 ATP 含量),从而评估可能影响这一过程的潜在药物化合物,这在炎症和肿瘤学领域至关重要。实验的具体细节(如细胞类型和趋化因子)会极大影响结果。
趋化实验针对不同靶点:上图展示了不同药物对针对特定趋化因子受体的趋化实验的影响。选择性 CCR2 拮抗剂 RS 504393 用于 THP-1 细胞测试;强效选择性 CCR4 拮抗剂 AZD2098 在 CD4+ T(reg) 细胞上评估;CCR8 拮抗剂 AZ084 用于 H9 细胞测试;GPR84 拮抗剂 GLPG1205 在中性粒细胞上评估。细胞迁移百分比与药物浓度相对应,提供了这些药物在调节细胞趋化中药效的检测。
三种实验对于理解癌细胞行为的不同方面都有重要价值,从基本的运动性到复杂的侵袭机制。
特别是趋化实验,对于研究免疫细胞向感染部位或肿瘤环境的迁移至关重要。
广泛用于评估治疗性化合物对细胞运动、趋化性和侵袭性的影响,助力抗癌和抗炎药物开发。
迁移实验测量细胞通过多孔膜的一般迁移能力;趋化实验专门评估细胞对下层室趋化因子的定向移动;侵袭实验在多孔膜上加入 Matrigel 等 ECM 屏障,细胞需先降解基质才能迁移,模拟组织侵袭过程。
细胞被放置在带有多孔膜的 96 孔板中,其向趋化因子的移动通常通过 ATP 含量进行定量化,从而评估可能影响这一过程的潜在药物化合物,在炎症和肿瘤学领域具有重要价值。
平台案例包括:THP-1 细胞上测试选择性 CCR2 拮抗剂 RS 504393,CD4+ T(reg) 细胞上评估 CCR4 拮抗剂 AZD2098,H9 细胞上测试 CCR8 拮抗剂 AZ084,中性粒细胞上评估 GPR84 拮抗剂 GLPG1205,以迁移百分比对应药物浓度反映药效。
细胞接种在涂有类 ECM 屏障的上层室,孵育后评估其穿透基质并迁移到下层室的能力,尤其适用于研究癌细胞的侵袭性以及抗转移治疗的有效性。
可与同平台的细胞粘附检测(评估整合素-配体相互作用,迁移侵袭的起始环节)、细胞划痕检测(创伤愈合模型量化迁移)以及细胞凋亡检测等下游读数组合,形成完整的细胞功能评价体系。