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传统Western Blot检测蛋白降解存在通量低、周期长、定量难等局限，难以满足PROTAC高通量筛选需求。爱思益普平台引入HiBiT（High Bioluminescence Tag）技术，通过CRISPR-Cas9基因编辑将HiBiT标签精准敲入内源性靶蛋白基因座，构建报告基因细胞系，实现蛋白降解的实时、定量、高通量监测。
HiBiT技术原理基于分裂式荧光素酶互补系统。HiBiT标签仅含11个氨基酸，通过基因编辑敲入靶蛋白C端后，不影响蛋白的天然表达与功能。检测时加入互补肽LgBiT及荧光素底物，两者结合形成完整荧光素酶，产生明亮的发光信号。当PROTAC分子诱导靶蛋白降解时，HiBiT标签随靶蛋白一同被降解，发光信号减弱，信号衰减程度直接反映降解效率。
平台已构建多种HiBiT敲入细胞系，包括STAT6 HiBiT A549细胞系、Jurkat STAT6 HiBiT-KI细胞系等。在KT-621研发中，平台利用Jurkat STAT6 HiBiT-KI细胞系验证降解活性，结果显示KT-621在human TH2细胞中展现出pM级亲和力，可完全阻断IL-4/13通路，其效力优于传统生物制剂dupilumab。这种内源性表达体系避免了外源转染的过度表达假象，数据更贴近生理真实。
高通量筛选方面，平台将HiBiT细胞系与自动化液体处理系统整合，可在72小时内完成对数十万种化合物的STAT6蛋白降解活性评估。通过实时监测荧光信号强度变化，量化靶蛋白降解效率（DC50）与降解程度（Dmax），将传统研发周期缩短60%以上。在某抗肿瘤PROTAC药物研发中，平台通过该技术筛选出高效降解BRD4蛋白的候选分子，使项目提前3个月进入临床前研发。
