我们使用 ELISA 方法检测 ADP 核糖聚合酶 PARP 家族的酶活性。组蛋白被涂覆在平板上，加入 PARP 蛋白（ PARP1/2/3 需要单链 DNA 断裂才能激活）以及生物素标记的 NAD 。随着反应的进行， PARP1 在组蛋白上形成生物素标记的 ADP 核糖链。然后，加入链霉亲和素标记的 HRP 和超灵敏检测试剂来检测信号。
我们在 PARP 选择性筛选方面也有丰富的经验。以下是我们对奥拉帕尼和 AZD5305 的测试数据。
当 PARP 与 DNA 和 NAD 形成复合物时，它会随着 ADP 核糖链的产生而与 DNA 解离。生物素标签被添加到单链 DNA 断裂处， PARP 蛋白被 His 标签标记。当添加抑制剂时， PARP 不会与 DNA 解离，从而可以检测供体和受体标签之间的荧光共振能量转移信号。
针对 PARP 靶点，我们启动了 PARP 抑制剂筛选细胞小组，包括 9 种癌症，共 70 种肿瘤细胞系。这包括 PARP 敲除细胞系、 BRCA 敲除细胞株、 BRCA 过表达细胞系、 BRCA 突变细胞系、 PARP 抑制剂抗性细胞系和一般肿瘤细胞系。该细胞组可用于 7-14 天的化合物测试，无论是作为单一疗法还是联合疗法，我们还根据客户需求提供定制解决方案。
Panel 特点：70 株细胞系覆盖 9 大瘤种；支持单药或联合用药测试；7-14 天长期化合物筛选；包含 BRCA-/- 及 PARP 抑制剂耐药细胞系。
与多聚 ADP- 核糖化相对，多聚 ADP- 核糖的水解在 DNA 损伤修复的过程中同样起到重要的作用。 Poly (ADP-ribose) glycohydrolase (PARG) 是多聚 ADP- 核糖水解酶的主要成员之一。
爱思益普针对 PARP 家族和 PARG 也设计并验证了一系列生化和细胞学的实验来助力化合物的筛选。
当PARP受到抑制时，具有缺陷DNA修复途径的细胞（如BRCA突变）变得容易受到DNA损伤，最终导致细胞死亡。这一概念被称为合成致死性，为肿瘤学中PARP抑制剂的开发铺平了道路，尤其在治疗BRCA突变肿瘤方面已获得突出地位。
我们使用ELISA方法检测PARP家族的酶活性：组蛋白被涂覆在平板上，加入PARP蛋白（PARP1/2/3需要单链DNA断裂才能激活）以及生物素标记的NAD，PARP1在组蛋白上形成生物素标记的ADP核糖链，再加入链霉亲和素标记的HRP和超灵敏检测试剂检测信号。
当PARP与DNA和NAD形成复合物时，会随着ADP核糖链的产生与DNA解离。我们将生物素标签添加到单链DNA断裂处，PARP蛋白用His标签标记；当添加抑制剂时PARP不与DNA解离，从而可以检测供体和受体标签之间的荧光共振能量转移信号。
PARP抑制剂筛选细胞小组包括9种癌症共70种肿瘤细胞系，涵盖PARP敲除、BRCA敲除、BRCA过表达、BRCA突变、PARP抑制剂抗性细胞系和一般肿瘤细胞系，可用于7-14天的化合物测试，支持单一疗法或联合疗法，并提供定制解决方案。
覆盖。PARG是多聚ADP-核糖水解酶的主要成员之一，多聚ADP-核糖的水解在DNA损伤修复过程中同样起到重要作用。爱思益普针对PARP家族和PARG设计并验证了一系列生化和细胞学实验，助力化合物的筛选。
