热位移分析( TSA , Thermal Shift assay )是一种通用且可靠的技术方案,用于评估蛋白质在各种条件下的稳定性,可以通过需要标记的 DSF-TSA 技术及无需标记的 nanoDSF-TSA 技术实现。其中 DSF-TSA (差式扫描荧光, Differential Scanning Fluorimetry )使用外源性荧光染料,通过检测蛋白质变性时的荧光变化来监测蛋白质的热展开。蛋白质通常以其天然的折叠状态存在,随着温度的升高,蛋白质分子的热运动加剧,导致疏水区域的展开和暴露。在此过程中,荧光染料与这些新暴露的疏水区域结合,导致荧光强度增加。一旦温度达到临界点(熔解温度 Tm ),未折叠的蛋白质就会聚集,阻止进一步的染料结合。这导致染料返回水性环境,引起荧光淬灭。因此,荧光强度先增加后减少,形成特征性的“熔解曲线”。通过绘制荧光强度与温度的关系图,可以确定蛋白质的 Tm 值。

DSF-TSA 技术可与 96 孔和 384 孔板兼容,能够高效、经济地分析多个样品或条件,具有高灵敏度和与广泛的仪器的兼容性,是研究蛋白质稳定性、确定稳定条件和支持药物发现工作流程的理想解决方案。 ICE 爱思益普团队凭借先进的 QuantStudio 7 Flex 系统,为药物研发客户提供蛋白质热稳定性分析、蛋白质及配体相互作用、缓冲液优化和制剂开发等检测服务,助力生物医药研发进程。
ICE 爱思益普具备每年研发超 500 个新靶点蛋白的能力,现已拥有 1000+ 高质量高活性小分子靶标蛋白产品, KRAS 、 WRN 、 CDK 等系列靶点数据已支持多个客户项目推进,减少研究试剂筛选及验证时间,从试剂阶段为客户研发项目加速。
ICE爱思益普拥有15年新药研发服务经验,技术团队硕士以上占比超过40%,已为600家以上的国内新药研发机构提供服务,得到客户广泛好评;每年有数百个项目进行新药临床研究(IND)申报,多个项目通过NMPA。
ICE 爱思益普拥有完备的供试品管理体系,引入 LIMS 系统进行项目及数据管理,实验记录、原始数据、实验报告均可满足申报要求。
P53 蛋白的 DSF-TSA 分析: DSF-TSA 技术可以精确检测蛋白质熔化温度( Tm ),以进行可靠的稳定性评估;药物分子与 P53 蛋白结合改变了蛋白的熔解曲线及 Tm 值,根据蛋白及其配体结合的 Tm 值不同可进行药物筛选。


DSF-TSA(差式扫描荧光)使用外源性荧光染料检测蛋白质变性时的荧光变化。升温使蛋白疏水区域展开暴露,染料与之结合荧光增强;达到熔解温度 Tm 后蛋白聚集,染料回到水性环境荧光淬灭,形成特征性熔解曲线,据此确定 Tm 值。
两者都属于热位移分析(TSA)技术。DSF-TSA 需要使用外源性荧光染料标记检测,而 nanoDSF-TSA 利用蛋白内源荧光实现无标记检测。DSF-TSA 可与 96 孔和 384 孔板兼容,能高效、经济地分析多个样品或条件,具有高灵敏度和广泛的仪器兼容性。
爱思益普团队凭借先进的 QuantStudio 7 Flex 系统,为药物研发客户提供蛋白质热稳定性分析、蛋白质及配体相互作用、缓冲液优化和制剂开发等检测服务,支持高通量药物筛选和 Tm 值检测。
以 P53 蛋白案例为例:DSF-TSA 技术可精确检测蛋白质熔解温度 Tm 进行可靠的稳定性评估;药物分子与 P53 蛋白结合会改变蛋白的熔解曲线及 Tm 值,根据蛋白及其配体结合的 Tm 值差异即可进行药物筛选。
爱思益普拥有 1000+ 高质量自研蛋白支持(每年研发超 500 个新靶点蛋白),团队具备 15 年新药研发服务经验、已为 600 家以上国内新药研发机构提供服务,并引入 LIMS 系统进行项目及数据管理,实验记录、原始数据、实验报告均可满足申报要求。