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质谱(MS)分子互作平台
MASS SPECTROMETRY

质谱分子互作平台

自 19 世纪末发现至今,质谱技术的发展历程跨越了多个世纪,已经成为科学研究中不可或缺的工具。质谱仪在生物医药研发中的应用非常广泛,涵盖了药物发现、药代动力学研究、毒性代谢研究、蛋白质组学、代谢组学等多个领域。 ICE 爱思益普团队依托 Thermo Fisher Scientific 旗下 Q Exactive ™ Plus Mass Spectrometer 系统,搭建了高效精准的基于质谱技术的新型分子互作平台,全面助力生物医药研发。

MASS SPECTROMETRY

质谱分子互作平台 检测服务

背景

Intact-MS 质谱法

Intact-MS ( Intact protein mass spectrometry )技术无需进行酶解或碎片化处理样品,保留了蛋白质的天然结构,可直接通过超高分辨质谱仪对其组成和修饰进行全面分析。这种方法基于质谱仪对离子的质荷比( m/z )进行测量,从而确定完整蛋白或蛋白复合物的分子量,为分析药物发现中生物分子的分子完整性、修饰和结合相互作用提供了强大的解决方案。这种无标记、高分辨率的方法特别适用于评估共价结合、结构异质性和翻译后修饰( PTMs ),提供关键数据以加速药物发现流程。

服务范围

共价结合化合物筛选 :能区分共价和非共价结合,准确检测及鉴定共价修饰及与靶蛋白结合的小分子化合物,能够高通量筛选共价结合化合物。

共价结合化合物表征: 量化共价结合化合物并确认其结合位点,测定Kinact/Ki(速率常数),能够更全面地评估共价抑制剂的活性,深入表征共价抑制剂结合。

蛋白表征: 高精度分子量测定及翻译后修饰评估。

我们拥有自有蛋白质库,已开发好数个靶点的共价化合物筛选方法,可以快速支持您的化合物筛选工作。 同时,我们具备建立新蛋白质检测方法的能力,可根据需求优化分析条件,每日样本处理容量可达约 200 个,能够高效助力您的药物筛选进程。

共价结合筛选策略流程:蛋白与化合物共孵育、样本制备、高分辨质谱检测、Intact MS 质量位移确认共价结合、MS/MS 定位结合位点、Kinact/KI 测定
共价结合筛选策略:从蛋白-化合物共孵育到 Kinact/KI 动力学表征的完整流程
已开发共价化合物筛选靶点:KRAS G12CEGFR wtWRNp53-Y220CSTAT5BTKAKTFGFR1/2……

共价抑制剂筛选策略

案例分享

KRAS-G12C 共价抑制剂评估

KRAS-G12C 共价抑制剂评估

AMG510 对 GDP-KRAS G12C 的共价结合占有率时间进程及 Kinact/KI 拟合(Kinact=0.0376 s⁻¹,KI=2.96 µM)
AMG510 共价结合占有率时间进程(左)与 Kinact/KI 测定(右)
AMG510 与 GDP-KRAS G12C 共价结合的 intact protein MS 时间进程

随着靶向共价抑制剂在制药行业治疗急性和慢性疾病的复苏,二阶速率常数 Kinact/Ki 成为首选的定量效力指标。我们成功开发了一个基于 INTACT-MS 的不可逆共价抑制剂快速动力学分析平台。使用 AMG510 与 GDP-KRASG12C 的共价结合作为测试案例,可以从完整蛋白质和肽段水平研究共价结合的占有率和结合位点。

ASMS 亲和力质谱法

亲和力质谱法 (ASMS, Affinity Selection Mass Spectrometry) 利用活性小分子能与靶蛋白结合的特点,通过体积排阻色谱以及高分辨率高灵敏度的质谱技术,将与靶标蛋白有结合力的小分子与游离的小分子分开并鉴定出来,此技术于均相溶液中进行,无需任何标记及固化处理靶点分子,适用于几乎所有的水溶性靶点(单体蛋白 / 复合体蛋白 /RNA 等),可以做到几千甚至上万个化合物一次分析的高效模式,广泛应用于小分子药物发现的早期筛选。

服务范围

药物分子高通量筛选
分子胶药物分子发现
靶向膜蛋白药物发现

技术原理

PARP1 蛋白与 65 种化合物的非共价结合筛选

ASMS亲和力质谱法筛选流程图

1 靶蛋白 + 化合物共孵育 蛋白-配体复合物与游离小分子共存 2 结合物分离(SEC / ALIS) 体积排阻色谱捕获蛋白-配体复合物 3 结合小分子检测(RP-LC/MS) Q Exactive 高分辨质谱 反相色谱释放配体,质谱鉴定结合物 ASMS:均相溶液中进行,无需标记与固化,单次分析可覆盖几千至上万个化合物

服务优势

高质量超 1000+ 自研蛋白支持

ICE 爱思益普具备每年研发超 500 个新靶点蛋白的能力,现已拥有 1000+ 高质量高活性小分子靶标蛋白产品, KRAS 、 WRN 、 CDK 等系列靶点数据已支持多个客户项目推进,减少研究试剂筛选及验证时间,从试剂阶段为客户研发项目加速。

专业且经验丰富的研发团队

ICE 爱思益普拥有 15 年新药研发服务经验,技术团队硕士以上占比超过 40% ,已为 600 家以上的国内新药研发机构提供服务,得到客户广泛好评;每年有数百个项目进行新药临床研究( IND )申报,多个项目通过 NMPA 的现场核查。

完善的数据管理体系及申报服务

ICE 爱思益普拥有完备的供试品管理体系,引入 LIMS 系统进行项目及数据管理,实验记录、原始数据、实验报告均可满足申报要求。

平台优势

询价及订购

共价结合筛选策略流程图
AMG510 Kinact/KI 测定
AMG510 与 GDP-KRAS G12C 共价结合 MS 时间进程
FAQ

常见问题

质谱分子互作平台依托什么仪器?

爱思益普团队依托 Thermo Fisher Scientific 旗下 Q Exactive Plus Mass Spectrometer 系统,搭建了高效精准的基于质谱技术的新型分子互作平台,涵盖 Intact-MS 质谱法和 ASMS 亲和力质谱法两大技术路线,全面助力生物医药研发。

什么是 Intact-MS 技术?可以做什么?

Intact-MS(完整蛋白质谱)技术无需酶解或碎片化样品,保留蛋白质天然结构,基于质荷比(m/z)测量确定完整蛋白或蛋白复合物分子量。该无标记、高分辨率方法适用于共价结合化合物高通量筛选与表征(测定 Kinact/Ki)、分子量测定及翻译后修饰评估。

什么是 ASMS 亲和力质谱法?

ASMS 利用活性小分子能与靶蛋白结合的特点,通过体积排阻色谱及高分辨质谱将结合的小分子与游离小分子分开并鉴定。技术在均相溶液中进行,无需标记及固化,适用于几乎所有水溶性靶点,可实现几千至上万个化合物一次分析。

质谱平台的通量和蛋白资源如何?

平台拥有自有蛋白质库,已开发好数个靶点的共价化合物筛选方法,可快速支持化合物筛选工作;同时具备建立新蛋白质检测方法的能力,可根据需求优化分析条件,每日样本处理容量可达约 200 个,高效助力药物筛选进程。

有共价抑制剂评价的质谱案例吗?

有。平台成功开发了基于 Intact-MS 的不可逆共价抑制剂快速动力学分析平台,使用 AMG510 与 GDP-KRASG12C 的共价结合作为测试案例,可从完整蛋白质和肽段水平研究共价结合的占有率和结合位点,以二阶速率常数 Kinact/Ki 定量评价共价抑制剂效力。

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